近年來,CRISPR/Cas9系統以其簡便、高效的技術特點,迅速成為植物中最為廣泛使用的基因組編輯手段,為種質資源創制以及基因功能研究等工作提供了極大的便利。CRISPR/Cas9系統在基因組上的精準切割需要特異識別一段鄰近核苷酸序列(PAM)。目前植物中最為廣泛使用的SpCas9蛋白能夠識別的PAM序列局限為經典的NGG序列,這嚴重限制了CRISPR/Cas9系統的可編輯范圍。為突破這個限制,科學家們在動物及微生物中進行了不懈的嘗試并獲得了一定的進展,然而在植物中尚未有成功的案例報道。
該創新團隊通過定點突變的方法對水稻中廣泛使用的SpCas9蛋白進行了改造,獲得了兩種Cas9 變體。通過一系列的轉基因實驗證明,兩種Cas9變體在水稻中分別可以識別NGA以及NGCG兩種PAM序列。生物信息學分析表明Cas9變體的創制將使得CRISPR/Cas9系統在水稻中可編輯范圍拓展到現有的2倍以上。此外,兩種變體也可以同時對多基因進行有效的編輯,表明其與野生型Cas9一樣具備巨大的應用潛力。因此,該工作為在水稻中進行更廣泛的基因組編輯提供了新的可選工具。

相關鏈接:http://www.cell.com/molecular-plant/fulltext/S1674-2052(16)00