中國農(nóng)業(yè)科學院是國家設(shè)立的中央級農(nóng)業(yè)科研機構(gòu),是全國綜合性農(nóng)業(yè)科學研究的最高學術(shù)機構(gòu),是農(nóng)業(yè)及農(nóng)業(yè)科學技術(shù)戰(zhàn)略咨詢機構(gòu),是三農(nóng)領(lǐng)域國家戰(zhàn)略科技力量,擔負著全國農(nóng)業(yè)重大基礎(chǔ)與應(yīng)用基礎(chǔ)研究、應(yīng)用研究和高新技術(shù)研究的任務(wù),致力于解決我國農(nóng)業(yè)及農(nóng)村經(jīng)濟發(fā)展中公益性、基礎(chǔ)性、全局性、戰(zhàn)略性、前瞻性的重大科學與技術(shù)問題。
院級獎成果
院級獎成果
水產(chǎn)飼用酶制劑N-酰基高絲氨酸內(nèi)酯降解酶創(chuàng)制與應(yīng)用
發(fā)布時間:2016-08-19
主要完成單位 :中國農(nóng)業(yè)科學院飼料研究所
主要完成人員 :周志剛,姚斌,楊雅麟,張美超,徐俐,何夙旭,于會民,曹雅男,楊祿良,李學軍
起 止 時 間 :2005年1月—2013年12月
獲 獎 情 況 :中國農(nóng)業(yè)科學院科學技術(shù)成果獎
內(nèi) 容 提 要 :
水產(chǎn)養(yǎng)殖細菌性病害(G-細菌病原占致病病因90%以上,又以嗜水氣單胞菌Aeromonas hydrophila占60%以上)嚴重制約著我國水產(chǎn)養(yǎng)殖可持續(xù)化發(fā)展與無公害水產(chǎn)品輸出。針對水產(chǎn)養(yǎng)殖細菌性病害有效預(yù)警及無抗防治的技術(shù)瓶頸,立足于群體感應(yīng)信號分子監(jiān)測及路徑阻斷策略,本項目確立了從G-病原菌群體感應(yīng)信號分子檢測、飼用阻斷策略挖掘到應(yīng)用評價的研究思路,建立了系統(tǒng)的從發(fā)病有效預(yù)警到無抗高效防治的基礎(chǔ)探索及產(chǎn)品開發(fā)的研究平臺,解決了信號分子野外在線檢測、N-酰基高絲氨酸內(nèi)酯降解酶創(chuàng)制、效能表達、成本控制、應(yīng)用評價和知識產(chǎn)權(quán)等瓶頸問題,開創(chuàng)了我國乃至全球基于群體感應(yīng)調(diào)控機制的水產(chǎn)養(yǎng)殖細菌性病害預(yù)警與防治體系,具有鮮明的原始創(chuàng)新特色,并迅速付諸實踐。本項目整體技術(shù)處于國際領(lǐng)先水平。
(1)率先建立了G-病原菌群體感應(yīng)信號分子N-酰基高絲氨酸內(nèi)酯野外在線檢測方法。通過生物指標菌及受體偶聯(lián)納米磁珠技術(shù),檢測靈敏度從nM級提升至pM級,檢測時限從48~72小時縮短至12~24小時,實現(xiàn)了水產(chǎn)養(yǎng)殖病原細菌群體感應(yīng)信號分子野外在線超敏檢測。
(2)創(chuàng)制了多種N-酰基高絲氨酸內(nèi)酯降解酶,均可滿足水產(chǎn)養(yǎng)殖環(huán)境及水產(chǎn)飼料加工需求。研制N-酰基高絲氨酸內(nèi)酯酶AiiA-B546、AiiA-AI96、QsdA-RH5及N-酰基高絲氨酸內(nèi)酯轉(zhuǎn)移酶AiiO-AIO6,現(xiàn)有表達水平分別達到3500單位/毫升、55單位/毫升、45單位/毫升及1000單位/毫升,高于國內(nèi)外其他報道水平10倍以上,處于國際領(lǐng)先水平。
(3)創(chuàng)建了水產(chǎn)養(yǎng)殖N-酰基高絲氨酸內(nèi)酯降解酶抗病應(yīng)用的分子評估體系。通過水產(chǎn)動物消化道菌群PCR-DGGE分析方法、qPCR分子計數(shù)技術(shù)、qRT-PCR免疫相關(guān)細胞因子與應(yīng)激Marker的分析體系、無菌斑馬魚測試模型以及水產(chǎn)動物離體腸囊評估模型,首次建立了N-酰基高絲氨酸內(nèi)酯降解酶水產(chǎn)養(yǎng)殖抗病應(yīng)用的系統(tǒng)評價平臺。
(1)率先建立了G-病原菌群體感應(yīng)信號分子N-酰基高絲氨酸內(nèi)酯野外在線檢測方法。通過生物指標菌及受體偶聯(lián)納米磁珠技術(shù),檢測靈敏度從nM級提升至pM級,檢測時限從48~72小時縮短至12~24小時,實現(xiàn)了水產(chǎn)養(yǎng)殖病原細菌群體感應(yīng)信號分子野外在線超敏檢測。
(2)創(chuàng)制了多種N-酰基高絲氨酸內(nèi)酯降解酶,均可滿足水產(chǎn)養(yǎng)殖環(huán)境及水產(chǎn)飼料加工需求。研制N-酰基高絲氨酸內(nèi)酯酶AiiA-B546、AiiA-AI96、QsdA-RH5及N-酰基高絲氨酸內(nèi)酯轉(zhuǎn)移酶AiiO-AIO6,現(xiàn)有表達水平分別達到3500單位/毫升、55單位/毫升、45單位/毫升及1000單位/毫升,高于國內(nèi)外其他報道水平10倍以上,處于國際領(lǐng)先水平。
(3)創(chuàng)建了水產(chǎn)養(yǎng)殖N-酰基高絲氨酸內(nèi)酯降解酶抗病應(yīng)用的分子評估體系。通過水產(chǎn)動物消化道菌群PCR-DGGE分析方法、qPCR分子計數(shù)技術(shù)、qRT-PCR免疫相關(guān)細胞因子與應(yīng)激Marker的分析體系、無菌斑馬魚測試模型以及水產(chǎn)動物離體腸囊評估模型,首次建立了N-酰基高絲氨酸內(nèi)酯降解酶水產(chǎn)養(yǎng)殖抗病應(yīng)用的系統(tǒng)評價平臺。
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